Tooted

Detergentide mõju P-glükoproteiini atpaasi aktiivsusele: erinevused põhi- ja verapamiilist sõltuvate tegevuste häiretes.

P-glükoproteiin (P-gp), plasmamembraani glükoproteiin, mis on seotud mitme ravimiresistentsuse fenotüübiga, vastutab erinevate amfifiilsete ravimite ATP-sõltuva väljavoolu eest.Kasutades multiravimiresistentsest rakuliinist DC-3F/ADX valmistatud membraanvesiikuleid, uurisime erinevate detergentide poolt esile kutsutud basaal- (st ravimi puudumisel) ja verapamiilist sõltuva P-gp ATPaasi aktiivsuse häireid mittelahustuval, samuti lahustuvatel kontsentratsioonidel.Progresseeruvat membraani lahustumist pesuaine kontsentratsiooni suurenemisega jälgiti valguse hajumise ja tsentrifuugimise katsetega.Mittelahustuvate detergentide kontsentratsioonide korral indutseerisid kõik testitud detergendid, välja arvatud DOC, P-gp ATPaasi aktiivsuse osalise inhibeerimise, mis ei olnud korrelatsioonis membraanidesse lisatud erinevate testitud detergentide kogusega.Verapamiili poolt indutseeritud P-gp aktivatsiooni analüüs näitab, et P-gp ATPaasi aktiivsust moduleerivad erinevad detergendid mittelahustuvates kontsentratsioonides erinevalt.Seega on P-gp ja detergentide vahelised spetsiifilised interaktsioonid tõenäolisemad kui globaalsed membraanihäired.Pärast solubiliseerimist erinevate testitud detergentidega inhibeeriti P-gp ATPaasi baasaktiivsus praktiliselt täielikult, välja arvatud CHAPS-i juuresolekul, mis suutis selle aktiivsuse säilitada tasemel, mis on võrreldav natiivsetes membraanides mõõdetud tasemega.Kuid verapamiili poolt indutseeritud P-gp ATPaasi aktivatsioon kadus P-gp solubiliseerimisel CHAPS-i poolt, kuid taastus pärast CHAPS-i lahjendamist alla selle kriitilise mitsellaarse kontsentratsiooni.Need tähelepanekud näitavad spetsiifilisi interaktsioone P-gp ja CHAPS molekulide vahel segamitsellides.Üldiselt on meie andmed, mis näitavad P-gp / detergentide spetsiifilisi koostoimeid, kooskõlas ravimite transpordikohtade asukohaga P-gp transmembraansetes domeenides.