Tooted

1. Uurisime isorhamnetiini pärssivat toimet seente türosinaasile pärssimise kineetika ja arvutusliku simulatsiooni abil.Isorhamnetiin inhibeeris segatüüpi türosinaasi pöörduvalt Ki = 0,235 ± 0,013 mM.Sisemise ja 1-anilinonaftaleen-8-sulfonaati (ANS) siduva fluorestsentsi mõõtmised näitasid, et isorhamnetiin ei kutsunud esile olulisi muutusi türosinaasi tertsiaarses struktuuris.Inaktiveerimisprotsessist ülevaate saamiseks arvutati kineetika ajaintervalli mõõtmiste ja pidevate substraadireaktsioonide abil.Tulemused näitasid, et isorhamnetiini poolt indutseeritud inaktiveerimine oli esimese järgu reaktsioon kahefaasiliste protsessidega.Täiendava ülevaate saamiseks simuleerisime türosinaasi ja isorhamnetiini vahelist dokkimist.Simulatsioon oli edukas (sidumisenergia Dock6.3 jaoks: -32,58 kcal/mol, AutoDock 4.2 jaoks: -5,66 kcal/mol ja Fred2.2 puhul: -48,86 kcal/mol), mis viitab sellele, et isorhamnetiin interakteerub mitmete jääkidega, nagu kui HIS244 ja MET280.See türosinaasi interaktsiooni ennustamise strateegia kombinatsioonis flavanooniühendil põhineva kineetikaga võib osutuda kasulikuks potentsiaalsete looduslike türosinaasi inhibiitorite skriinimisel.

2. Kanamunavalge monomeerse glükoproteiini konalbumiini (CA) happelise lahtivoldimise rada on uuritud kaug- ja lähi-UV CD spektroskoopia, sisemise fluorestsentsi emissiooni, välise fluorestsentsi sondi 1-anilino-8-naftaleensulfonaati (ANS) abil. ja dünaamiline valguse hajumine (DLS).Vaatleme pH-st sõltuvaid muutusi CA sekundaarses ja tertsiaarses struktuuris.Sellel on natiivne α-spiraalne sekundaarne struktuur pH 4,0 juures, kuid kadustruktuur pH 3,0 juures.CA eksisteeris eranditult sulamiseelse ja sulanud gloobuli olekuna lahuses vastavalt pH 4,0 ja pH 3,0 juures.PH mõju CA konformatsioonile ja termostabiilsusele viitab selle kuumakindlusele neutraalse pH juures.DLS-i tulemused näitavad, et MG olek eksisteeris kompaktse vormina vesilahustes, mille hüdrodünaamiline raadius oli 4, 7 nm.Trüptofaani fluorestsentsi kustutamine akrüülamiidiga kinnitas veelgi osaliselt voldimata vahepealse oleku akumuleerumist natiivse ja voltimata oleku vahel.