Tooted

Tet 5-metüültsütosiini dioksügenaasid katalüüsivad DNA demetüleerimist, tekitades 5-hüdroksümetüültsütosiini ja täiendavalt oksüdeeritud tooteid.Tet1 ja Tet2 ekspresseeruvad kõrgelt hiire pluripotentsetes rakkudes ja somaatilistes rakkudes erineval määral allareguleeritud, kuid transkriptsioonimehhanismid on ebaselged.Siin määratlesime Tet1 ja Tet2 promootori ja võimendaja domeenid.Tet1 15-kb "supervõimendis" on kaks transkriptsiooni algussaiti (TSS), millel on arenduse ajal erinevad aktiveerimismustrid.Distaalsest TSS-ist ülesvoolu asuv 6 kb pikkune promootorpiirkond on naiivsetes pluripotentsetes rakkudes väga aktiivne, teatab autonoomselt Tet1 ekspressioonist transgeenses süsteemis ning kultiveeritud rakkudes ja natiivsetes epiblastides diferentseerumisel läbib kiiresti DNA metüülimise ja vaigistamise.Teise TSS-i allavoolu, mis on seotud konstitutiivselt nõrga CpG-rikka promootoriga, aktiveerib naabruses asuv võimendaja naiivsetes embrüonaalsetes tüvirakkudes (ESC) ja praimitud epiblastitaolistes rakkudes (EpiLC).Tet2-l on pluripotentsusest sõltumatu aktiivsusega CpG saare p rooter ja ESC-spetsiifiline distaalne intrageenne võimendaja;viimane on EpiLC-des kiiresti alla reguleeritud.Meie uuring näitab Tet1 ja Tet2 transkriptsiooni reguleerimise erinevaid viise varajase arengu raku oleku ülemineku ajal.Uued transgeensed reporterid, mis kasutavad Tet1 ja Tet2 cis-regulatiivseid domeene, võivad eristada nüansirikkaid muutusi pluripotentsetes olekutes ja nende aluseks olevaid epigeneetilisi variatsioone.