Tooted

Karboanhüdraasi aktivaatorid: esimene inimese sekretoorse isovormi VI aktiveerimise uuring aminohapete ja amiinidega.

Inimese karboanhüdraasi (hCA, EC 4.2.1.1) sekretoorne isosüüm hCA VI on kloonitud, ekspresseeritud ja puhastatud bakteriaalses ekspressioonisüsteemis.CO(2) hüdratatsioonireaktsiooni kineetilised parameetrid näitasid, et hCA VI ak(cat) on 3,4 x 10(5)s(-1) ja k(cat)/K(M) 4,9 x 10(7) M (-1)s(-1) (pH 7,5 ja 20 kraadi C juures).hCA VI-l on märkimisväärne katalüütiline aktiivsus füsioloogilise reaktsiooni jaoks, samas suurusjärgus kui üldlevinud isovorm CA I või transmembraanne kasvajaga seotud isosüüm CA IX.Näidati, et mitmed aminohapped ja amiinid toimivad erineva efektiivsusega CA VI aktivaatoritena.l-His, l-Trp ja dopamiin näitasid nõrka CA VI aktiveerivat toimet (K(A)s vahemikus 21-42 mikroM), samas kui d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotoniin , ja mõned püridüülalküülamiinid olid paremad aktivaatorid, K(A)s vahemikus 13-19 mikroM.Parimad CA VI aktivaatorid olid l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe ja histamiin, K(A)s vahemikus 1,23-9,31 mikroM.Kõik need aktivaatorid võimendavad k(cat), omamata K(M)-le mõju, osaledes seega katalüütilise tsükli kiiruse määramise etapis, prootoniülekande reaktsioonides ensüümi aktiivse saidi ja keskkonna vahel.