ONPG CAS:369-07-3 98,0% Minimaalne valge kuni valkjas pulber
| Kataloogi number | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| tootenimi | ONPG (2-nitrofenüül-beeta-D-galaktopüranosiid) |
| Molekulaarvalem | C12H15NO8 |
| Molekulmass | 301,25 |
| Salvestusruumi üksikasjad | 2 kuni 8 °C |
| Harmoneeritud tariifikoodeks | 29 400 000 |
Toote spetsifikatsioon
| Puhtus (HPLC) | Min.98,0% |
| Välimus | Valge kuni valkjas pulber |
| Lahendus(1% vees) | Selge, värvitu kuni kergelt kollakas lahus |
| Veesisaldus(Karl Fisher) | Max0,5% |
| Optiline eripööre [α]D20 (c=1, H2O) | -65,0 °C kuni -73,0 °C |
Arutelu ONPG testi (β-galaktosidaasi test) üle
Viimasel ajal on sageli tõstatatud küsimusi: 1. Miks saab ONPG testi kasutada laktoosi hilinenud fermentatsiooni eristamiseks?2. Miks on riiklikus standardis kirjas, et ONPG testis on vaja kasutada 3% naatriumkloriidi trisahhariidrauda (või trisahhariidrauda)?3. Miks tuleks Vibrio parahaemolyticus'e puhul OPNG testi läbiviimisel lisada tilkhaaval vastavalt standardile tolueeni?Mis on funktsioon?
Meie ettevõte on läbi vaadanud palju teavet, teinud sellest kokkuvõtte ja jaganud seda teiega allpool:
Põhimõte: ONPG hiina nimi on o-nitrobenseen-β-D-galaktopüranosiid.ONPG saab β-galaktosidaasi abil hüdrolüüsida galaktoosiks ja kollaseks o-nitrofenooliks (ONP), nii et β-galaktosidaasi aktiivsust saab tuvastada söötme värvimuutuse järgi.
Laktoos on suhkur, mida enamik mikroorganisme peab tuvastama.Selle metabolism nõuab kahte ensüümi, üks on raku permeaas, laktoos siseneb rakkudesse permeaasi toimel;teine on β-galaktosidaas, mis hüdrolüüsib laktoosi galaktoosiks.Laktoos ja glükoos.β-galaktosidaas võib samuti otseselt mõjutada ONPG-d, hüdrolüüsides selle galaktoosiks ja kollaseks o-nitrofenooliks (ONP).Seda saab teha 24 tunni jooksul, isegi laktoosi viivitusega fermenteerijatega.Seetõttu selgitab see vaatlustulemusi kultuuri 1 korjamisel agari kaldpinnalt ja nakatamist täisringiga temperatuuril 36 °C 1–3 tundi ja 24 tundi.Kui toodetakse β-galaktosidaasi, muutub see kollaseks 1-3 tunniga, kui sellist ensüümi ei ole, ei muuda see värvi 24 tunniga.
Vastavalt kahele ülaltoodud ensüümile võib mikroorganismid jagada järgmistesse kategooriatesse:
1 laktoosi kääriv (18-24 tundi) bakter permeaasi ja β-galaktosidaasiga P + G +;
2 Hilinenud laktoosifermentaatorid (kestab kauem kui 24 tundi), millel puudub permeaas, kuid millel on galaktosidaas: P-G+.
3 Mittelaktoossed fermentaatorid, millel puuduvad nii permeaas kui galaktosidaas: P-G-.
ONPG testi saab kasutada laktoosijäägiga fermenteerivate bakterite (P-G+) eristamiseks mittefermenteerivatest laktoosibakteritest (PG-), näiteks:
1 Eristage hilised laktoosi fermenteerijad (P-G+) mittelaktoosi fermentaatoritest (P-G-).
a) Citrobacter (+) ja Salmonella arizonae (+) Salmonellast (-).
(b) Escherichia coli (+) pärit Shigella sonnei (-).
Miks viidi ONPG test läbi, kasutades üleöö kultuuri 3% naatriumkloriidi raudtrisahhariidil (raud trisahhariid)?Meie ettevõte on palju teavet uurinud, kuid selget väidet pole.Ainult FDA veebisaidil on kirjas, et "Inokuleerige testitavad kultuurid kolmekordsele suhkru-raudagarile ja inkubeerige 18 tundi 37 °C juures (või vajaduse korral muul sobival temperatuuril) Võib kasutada ka % laktoosi."tähendab: testitavad bakterid inokuleeriti trisahhariidi rauasöötmele ja kultiveeriti 37 °C juures 18 tundi.Lubatud on ka 1% laktoosi sisaldav toiteagar (või muu) sööde.Seetõttu järeldatakse, et trisahhariidi rauasööde sisaldab laktoosi.Pärast üleöö kasvu on bakterid tootnud hea aktiivse β-galaktosidaasi.Selliseid baktereid kasutades saab ONPG-d β-galaktosidaasi toimel kiiremini lagundada.Eksperimentaalne nähtus avaldub kiiremini ja paremini.Lisaks on β-galaktosidaasi täielikuks vabastamiseks tilkhaaval tolueeni lisamine ja 5-minutiline veevann.
