X-GAL CAS:7240-90-6 98% valge kuni valkjas kristalne pulber
| Kataloogi number | XD90008 |
| tootenimi | X-Gal (5-bromo-4-kloro-3-indolüül-beeta-D-galaktopüranosiid) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molekulaarvalem | C14H15BrClNO6 |
| Molekulmass | 408,63 |
| Salvestusruumi üksikasjad | -2 kuni -6 °C |
| Harmoneeritud tariifikoodeks | 29 400 000 |
Toote spetsifikatsioon
| Lahuse välimus | Selge, värvitu kuni helekollane lahus (50 mg/ml DMF:MeOH-s, 1:1) |
| Spetsiifiline optiline pöörlemine | -61,5 +/- 1 |
| Välimus | Valge kuni valkjas kristalne pulber |
| Puhtus HPLC | min 99% |
| Lahustuvus (5% DMF-s) | Lahustuv (5% w/v, DMF) |
| Vesi KF | max 1% |
| Analüüs (HPLC veevabal alusel) | min 98% w/w |
X-gal kasutusalad
X-gal (lühendatult ka BCIG tähistab 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galaktopüranosiidi) on orgaaniline ühend, mis koosneb galaktoosist, mis on seotud asendatud indooliga.Selle ühendi sünteesisid Jerome Horwitz ja kaastöötajad 1964. aastal. Ametlikku keemilist nimetust lühendatakse sageli vähem täpseteks, kuid ka vähem tülikateks fraasideks, nagu bromokloroindoksüülgalaktosiid.Indoksüülist pärinev X võib olla X-i allikaks X-gal kontraktsioonis.X-gali kasutatakse sageli molekulaarbioloogias, et testida ensüümi β-galaktosidaasi olemasolu selle tavapärase sihtmärgi, β-galaktosiidi asemel.Seda kasutatakse ka selle ensüümi aktiivsuse tuvastamiseks histokeemias ja bakterioloogias.X-gal on üks paljudest indoksüülglükosiididest ja estritest, mis annavad ensüümkatalüüsitud hüdrolüüsi tulemusena indigovärviga sarnaseid lahustumatud siniseid ühendeid.
X-gal on laktoosi analoog ja seetõttu võib seda hüdrolüüsida β-galaktosidaasi ensüüm, mis lõhustab D-laktoosi β-glükosiidsideme.X-gal β-galaktosidaasi poolt lõhustatuna annab galaktoosi ja 5-bromo-4-kloro-3-hüdroksüindooli - 1. Viimane seejärel spontaanselt dimeriseerub ja oksüdeerub 5,5'-dibromo-4,4'-dikloroks. -indigo - 2, intensiivselt sinine toode, mis on lahustumatu.X-gal ise on värvitu, seega võib sinise toote olemasolu kasutada aktiivse β-galaktosidaasi olemasolu testimiseks.See võimaldab ka bakteriaalset β-galaktosidaasi (nn lacZ) kasutada reporterina erinevates rakendustes.
Kahe hübriidanalüüsi korral võib β-galaktosidaasi kasutada reporterina, et tuvastada üksteisega interakteeruvaid valke.Selle meetodi puhul saab genoomiraamatukogusid skriinida valkude interaktsiooni suhtes, kasutades pärmi või bakteriaalset süsteemi.Kui skriinitavate valkude vahel on edukas interaktsioon, siis selle tulemuseks on aktiveerimisdomeeni seondumine promootoriga.Kui promootor on seotud lacZ geeniga, näitab β-galaktosidaasi tootmine, mille tulemuseks on sinise pigmentatsiooniga kolooniate moodustumine X-gal juuresolekul, seega edukat valkude interaktsiooni.See meetod võib piirduda selliste raamatukogude skriinimisega, mille suurus on alla umbes 106. X-gal edukas lõhustamine tekitab indooli lendumise tõttu ka märgatavalt ebameeldiva lõhna.
Kuna X-gal ise on värvitu, võib aktiivse β-galaktosidaasi olemasolu testimiseks kasutada sinise värvi toote olemasolu.
See aktiivse ensüümi lihtne tuvastamine võimaldab β-galaktosidaasi geeni (lacZ-geeni) kasutada reportergeenina erinevates rakendustes.
