Tooted

CTP:fosfokoliintsütidülüültransferaas α (CCTα) on tuumaensüüm, mis katalüüsib kiirust piiravat etappi fosfatidüülkoliini (PC) sünteesi CDP-koliini rajas.CCTα lipiidide aktiveerimine põhjustab selle translokatsiooni tuumaümbrisesse ja tuumasisese membraanivõrgu, mida nimetatakse nukleoplasmaatiliseks retikulumiks (NR), laienemise mehhanismi abil, mis hõlmab membraani deformatsiooni.Tuumalamiinid on vajalikud ka NR stabiilsuse ja leviku tagamiseks, kuid pole teada, kas seda ainulaadset struktuuri või tuumakihti üldiselt on vaja PC sünteesiks.Selle seose uurimiseks kahandati tuuma kiht RNAi-ga või häiriti Hutchinson-Gilfordi progeeria sündroomi (HGPS) mutantse laminaadi A (progeriin) ekspressiooniga ning analüüsiti mõju CCTα ja koliini metabolismile.Lamin A / C või lamin B1 siRNA-vahendatud vaigistamine CHO rakkudes NR vähendamiseks ei mõjutanud PC sünteesi, samas kui topeltknockdown inhibeeris seda rada mittespetsiifiliselt.Kinnitades tema väikest rolli PC sünteesis, tuvastati NR-is vaid 10% ajutiselt üleekspresseeritud koliini/etanoolamiini fosfotransferaasist.CHO rakkudes oli CCTα nukleoplasmaatiline ja koos GFP-progeriiniga tuumavoltides ja invaginatsioonides;aga HGPS-i fibroblastid näitasid CCTα ebanormaalset jaotumist tsütoplasmas ja tuumaümbrises, millega kaasnes PC sünteesi 2-kordne vähenemine.Vaatamata selle muutunud lokaliseerimisele näitasid koliini märgistamise katsed, et CCT aktiivsust ei mõjutanud ja PC sünteesi pärssimist jälgiti hemikoliiniumi suhtes tundliku koliini transporteri aktiivsuse vähenemisega.Me järeldame, et CCTα ja lamiinid teevad NR-i moodustamiseks spetsiifilist koostööd, kuid tuumaümbrise üldine struktuur mõjutab CCT aktiivsust ja PC sünteesi minimaalselt.