Tooted

Üks tegureid, mis takistab regeneratiivse meditsiini kliinilist kasutamist degeneratiivsete kõhrehaiguste korral, on sobiv rakuallikas.Kondrotsüüdid, ainus kõhre rakutüüp, mida kasvatatakse in vitro kultiveerimistingimustes rakkude arvu suurendamiseks, kaotavad oma fenotüübi koos võime genereerida hüaliinset kõhrekoe.Selles uuringus tegime kindlaks, et seerumi- ja kasvufaktorivaba kolmemõõtmeline (3D) kultuurisüsteem taastab läbitud kondrotsüütide võime moodustada in vitro kõhrekudet, mis hõlmab sox9. Veiste liigesekondrotsüüte passeeriti kaks korda võimaldab rakkude arvu laienemist (P2) ja kasvatada suure tihedusega 3D-tüüpi II kollageeniga kaetud membraanidel kõrge glükoosisisaldusega söötmes, millele on lisatud insuliini ja deksametasooni (SF3D).Rakke iseloomustati pärast monokihi laiendamist ja 3D-kultuuri järgimist voolutsütomeetria, geeniekspressiooni ja histoloogia abil.Iseloomustati varaseid muutusi signaaliülekande radades diferentseerumise ajal. P2 rakkudel oli eellaslaadne antigeeni profiil 99% CD44(+) ja 40% CD105(+) ning geeniekspressiooniprofiil, mis viitas tsoonidevahelistele rakkudele.P2 SF3D-s ekspresseeris kondrogeenseid geene ja kogunenud rakuvälist maatriksit.Insuliini retseptori (IR) allareguleerimine HNMPA-(AM3) või PI-3/AKT kinaasi raja (aktiveeritud insuliinraviga) Wortmanniniga inhibeeris kollageeni sünteesi.HNMPA-(AM3) vähendas Col2, Col11 ja IR geenide, samuti Sox6 ja -9 ekspressiooni.HNMPA-(AM3)-ga töödeldud rakkude kaasimmunosadestamise ja kromatiini immunosadestamise analüüsid näitasid koaktivaatorite Sox6 ja Med12 seondumist Sox9-ga, kuid vähendasid Sox9-Col2a1 seondumist. Kirjeldame uudset kultiveerimismeetodit, mis võimaldab suurendada kondrotsüütide arvu ja soodustab hüaliinitaolise kõhrekoe moodustumine osaliselt insuliini vahendatud Sox9-Col2a1 seondumise kaudu.Selle lähenemisviisiga loodud koe sobivust liigeste parandamiseks tuleb uurida in vivo.