Tooted

Oleme varem loonud hiire kudedest (soolest, maost, kõhunäärmest ja maksast) ning inimese soolest ja kõhunäärmest pärinevate organoidide pikaajalise 3-mõõtmelise kultuuri.Siin kirjeldame tingimusi, mis on vajalikud inimese mao tüvirakkude pikaajaliseks kolmemõõtmeliseks kasvatamiseks.Seda tehnoloogiat saab rakendada epiteeli vastuse uurimiseks Helicobacter pylori infektsioonile. Loosime organoidid inimese mao korpuse kirurgilistest proovidest.Kultiveerimistingimused töötati välja hiire mao- ja inimese soolesüsteemi tingimuste põhjal.Organoidide H pyloriga nakatamiseks kasutasime mikrosüsti.Epiteeli vastuseid mõõdeti mikrokiibi ja kvantitatiivse polümeraasi ahelreaktsiooni analüüside abil. Inimese maorakke laiendati kolmemõõtmelistes kultuurides määramata ajaks.Kultiveerisime tervete mao kudede rakke, üksikult sorteeritud tüvirakke või kasvajakudesid.Organoidid säilitasid oma vastavate kudede paljud omadused, mis põhinevad nende histoloogial, markerite ekspressioonil ja euploidsusel.Tervetest kudedest pärit organoidid väljendasid 4 maoliini markereid ja organiseerusid ise näärmete ja süvendite domeenideks.Nikotiinamiidi lisamise ja WNT eemaldamise abil saab neid suunata spetsiifiliselt ekspresseerima kas maonäärme või maoõõne liini.Kuigi mao süvendite liinidel oli bakteriaalsele infektsioonile ainult marginaalne reaktsioon, tekkis maonäärmete liinidel tugev põletikuline reaktsioon. Töötasime välja süsteemi inimese mao organoidide kultiveerimiseks.Seda süsteemi saab kasutada H pylori infektsiooni ja muude maopatoloogiate uurimiseks.Autoriõigus © 2015 AGA Institute.Väljaandja Elsevier Inc. Kõik õigused kaitstud.