Tooted

Enamikul loomadel, kellel on X- ja Y-sugukromosoomid, kasutatakse kromosoomi hõlmavaid mehhanisme, et tasakaalustada X-seotud geeniekspressiooni isas- ja emasloomadel.Kärbsel Drosophila melanogaster laieneb annuse kompenseerimise mehhanism üldiselt ka X-seotud transgeenidele.Rohkem kui 70 transgeenset austraalia lambakärbse Lucilia cuprina liini on loodud osana jõupingutustest arendada selle peamise lammaste kahjuri geneetiliseks tõrjeprogrammiks ainult isastüvesid.Kõik liinid kannavad konstitutiivselt ekspresseeritud fluorestsentsvalgu markergeeni.Kõigis 12 X-seotud liinis näitavad emased vastsed heledamat fluorestsentsi kui isastel vastsetel, mis viitab sellele, et markergeen ei ole annust kompenseeritud.Seda on kinnitatud valitud liinide kvantitatiivse RT-PCR abil.Et teha kindlaks, kas endogeensed X-seotud geenid on annusega kompenseeritud, eraldasime 8 geeni, mis on D. melanogasteri neljandas kromosoomis olevate geenide ortoloogid.Hiljutised tõendid viitavad sellele, et D. melanogasteri neljas kromosoom ehk Mulleri element F on Diptera esivanemate X-kromosoom, mis on Drosophila liikide puhul muutunud autosoomiks.Me näitame meeste ja naiste DNA kvantitatiivse PCR abil, et 8 siderühma F geenist 6 asuvad L. cuprina X-kromosoomil.Ülejäänud kaks Mulleri elemendi F geeni leiti olevat L. cuprina puhul autosomaalsed, samas kui kaks Mulleri elemendi B geeni leiti samast X-kromosoomi piirkonnast D. melanogaster Ephrini ja gawky geenide L. cuprina ortoloogidega.Leiame, et L. cuprina X kromosoomi geenid ekspresseeruvad võrdselt nii meestel kui naistel (st täielikult kompenseeritud doosiga).Seega näib erinevalt Drosophilast, et Lucilia annuse kompenseerimise süsteem on spetsiifiline X-kromosoomi endogeensete geenide jaoks ja seda ei saa hiljuti saabunud transgeenid kasutada.